復(fù)習(xí)必背——高中生物實(shí)驗(yàn)大全(1)
最近到期末，很多同學(xué)留言需要關(guān)于生物實(shí)驗(yàn)的知識(shí)點(diǎn)，周末就給大家準(zhǔn)備了一份生物實(shí)驗(yàn)大全，期末考試希望大家用得上。如果你考完了，也沒(méi)有關(guān)系，可以收藏了進(jìn)行預(yù)習(xí)和復(fù)習(xí)喔！
一、用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞
1.實(shí)驗(yàn)原理
(1)放大倍數(shù)的計(jì)算，顯微鏡的放大倍數(shù)等于目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積。
(2)放大倍數(shù)的實(shí)質(zhì)：放大倍數(shù)是指放大的長(zhǎng)度或?qū)挾?，不是指面積或體積。
(3)高倍顯微鏡的作用：可以將細(xì)胞放大，更清晰地觀察到細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)，有利于區(qū)別不同的細(xì)胞。
2.操作步驟
[深度思考]
(1)如何區(qū)分目鏡與物鏡，其長(zhǎng)短與放大倍數(shù)之間存在怎樣的關(guān)系？
提示 目鏡無(wú)螺紋，物鏡有螺紋。物鏡越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越大；目鏡越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越小。
(2)為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野中央，再換高倍物鏡觀察？
提示 低倍鏡下視野范圍大，而高倍鏡下視野范圍小，如果直接用高倍物鏡觀察，往往由于觀察的物像不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野中央，再換高倍物鏡觀察。
(3)如何把物像移到視野中央？
提示 物像在視野中偏向哪個(gè)方向，裝片就向哪個(gè)方向移動(dòng)，簡(jiǎn)稱“偏哪移哪”。
(4)若視野中出現(xiàn)一半亮一半暗；觀察花生切片標(biāo)本材料一半清晰一半模糊不清，出現(xiàn)上述兩種情況的可能原因分別是什么？
提示 前者可能是反光鏡的調(diào)節(jié)角度不對(duì)；后者可能是由花生切片厚薄不均勻造成的。
(5)若所觀察視野中有“污物”，應(yīng)如何判斷“污物”位置？
提示
[方法技巧]
1.關(guān)注顯微鏡使用的“4”個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)
(1)必須先用低倍物鏡觀察，找到要觀察的物像，移到視野中央，然后再換用高倍物鏡。
(2)換用高倍物鏡后，不能再轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，只能用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋來(lái)調(diào)節(jié)。
(3)換用高倍物鏡后，若視野太暗，應(yīng)先調(diào)節(jié)遮光器(換大光圈)或反光鏡(用凹面反光鏡)使視野明亮，再調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。
(4)觀察顏色深的材料，視野應(yīng)適當(dāng)調(diào)亮，反之則應(yīng)適當(dāng)調(diào)暗。
2.顯微鏡下細(xì)胞數(shù)目的兩種計(jì)算方法
若視野中的細(xì)胞為單行，計(jì)算時(shí)只考慮長(zhǎng)度和寬度；若視野中充滿細(xì)胞，計(jì)算時(shí)則要考慮面積的變化。
(1)若視野中為一行細(xì)胞，高倍鏡下細(xì)胞數(shù)量與低倍鏡下細(xì)胞數(shù)量之比等于其放大倍數(shù)之比的倒數(shù)。
(2)若視野中充滿細(xì)胞，則高倍鏡下細(xì)胞數(shù)量與低倍鏡下細(xì)胞數(shù)量之比等于其放大倍數(shù)之比的倒數(shù)的平方。
二、檢測(cè)生物組織中的糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)
1.實(shí)驗(yàn)原理
2.實(shí)驗(yàn)步驟
[深度思考]
(1)上述實(shí)驗(yàn)選材的標(biāo)準(zhǔn)是什么？
提示 ①被檢測(cè)物質(zhì)含量豐富；②材料接近無(wú)色；③易取材，易操作等。
(2)實(shí)驗(yàn)中，在加相應(yīng)試劑之前為何要留出部分組織樣液？
提示 作為對(duì)照，以便與鑒定后的樣液顏色作對(duì)比，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力。
(3)鑒定還原糖時(shí)使用的斐林試劑為何要現(xiàn)配現(xiàn)用？
提示 因?yàn)殪沉衷噭┖懿环€(wěn)定，容易產(chǎn)生藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀，所以應(yīng)將甲液和乙液分別保存，使用時(shí)現(xiàn)配現(xiàn)用。
(4)蔗糖溶液中加入斐林試劑后呈現(xiàn)什么顏色？
提示 蔗糖屬于非還原糖，不與斐林試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。觀察到的現(xiàn)象不是無(wú)色，而是藍(lán)色[Cu(OH)2的顏色]。
(5)在使用雙縮脲試劑時(shí)，為什么要先加入試劑A，后加入試劑B?
提示 先加入試劑A，造成堿性環(huán)境，只有在堿性環(huán)境中，蛋白質(zhì)才容易與Cu2＋發(fā)生顏色反應(yīng)。
(6)鑒定蛋白質(zhì)時(shí)，加入試劑B后，如果沒(méi)有產(chǎn)生紫色反應(yīng)，可能的原因是什么？
提示 可能加入的雙縮脲試劑B過(guò)量，CuSO4在堿性溶液中生成大量的藍(lán)色Cu(OH)2絮狀沉淀，會(huì)遮蔽實(shí)驗(yàn)中所產(chǎn)生的紫色，影響觀察結(jié)果。
(7)脂肪鑒定實(shí)驗(yàn)中為什么用50%的酒精洗去浮色，而不用清水？
提示 因?yàn)樘K丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ易溶于有機(jī)溶劑酒精中，而不溶于清水中。
[技法提煉]
1.利用“一同三不同”區(qū)分斐林試劑與雙縮脲試劑
“一同”是指都含有NaOH和CuSO4兩種成分，且NaOH溶液的質(zhì)量濃度都為0.1 g/mL。
“三不同”分別指：(1)使用原理不同。斐林試劑的實(shí)質(zhì)是新配制的Cu(OH)2溶液，雙縮脲試劑的實(shí)質(zhì)是堿性環(huán)境中的Cu2＋。
(2)使用方法不同。鑒定還原糖時(shí)將甲、乙兩液等量混勻后立即使用；鑒定蛋白質(zhì)時(shí)先加A液1 mL搖勻，然后加B液4滴，振蕩搖勻。
(3)CuSO4溶液的濃度不同。斐林試劑中CuSO4溶液的質(zhì)量濃度為0.05 g/mL，雙縮脲試劑中CuSO4溶液的質(zhì)量濃度為0.01 g/mL。
2.三類(lèi)有機(jī)物檢測(cè)在操作步驟上的差異
(1)唯一需要加熱——還原糖檢測(cè)，且必須水浴加熱，不能用酒精燈直接加熱。若不加熱，則無(wú)磚紅色沉淀出現(xiàn)。
(2)唯一需要顯微鏡——脂肪檢測(cè)。
(3)混合后加入——斐林試劑；分別加入——雙縮脲試劑(先加A液，后加B液，且B液不能過(guò)量)。
三、觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布
1.實(shí)驗(yàn)原理
(1)甲基綠和吡羅紅對(duì)DNA和RNA的親和力不同：甲基綠＋DNA→綠色；吡羅紅＋RNA→紅色。
(2)鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)可使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA和染色劑結(jié)合。
2.實(shí)驗(yàn)步驟
[深度思考]
(1)實(shí)驗(yàn)選材時(shí)，為何不選用紫色洋蔥外表皮細(xì)胞或葉肉細(xì)胞？
提示 紫色洋蔥外表皮細(xì)胞含紫色液泡，葉肉細(xì)胞含葉綠體，易對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成顏色干擾。
(2)不能用哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞觀察DNA和RNA分布的原因是什么？
提示 哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核，沒(méi)有DNA。
(3)制片時(shí)，為何滴加0.9%的NaCl溶液？
提示 0.9%的NaCl溶液可以保持口腔上皮細(xì)胞的正常形態(tài)。
(4)水解之前，為何用酒精燈烘干載玻片？
提示 烘干可迅速殺死并固定細(xì)胞，否則細(xì)胞內(nèi)的溶酶體會(huì)對(duì)核酸造成破壞。
(5)觀察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的實(shí)驗(yàn)中，用緩水流沖洗載玻片的目的是什么？
提示 防止細(xì)胞被水流沖走。
(6)由上述實(shí)驗(yàn)得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)論是什么？
提示 DNA主要分布在細(xì)胞核中，RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。
[易錯(cuò)警示]
觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)
(1)吡羅紅甲基綠染色劑：混合使用，且現(xiàn)用現(xiàn)配。
(2)DNA和RNA在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中均有分布，只是量不同，故結(jié)構(gòu)中強(qiáng)調(diào)“主要”而不能說(shuō)“只”存在于細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)中。
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